儲(chǔ)存條件
-20℃
中文名稱
NADP蘋果酸酶(NADP-ME)活性檢測(cè)試劑盒輔酶
有效期
6個(gè)月
單位
盒
英文名稱
NADP Malic Enzyme(NADP-ME) Activity Assay Kit
檢測(cè)方法
紫外分光光度法 Spectrophotometer
規(guī)格
50T/48S

產(chǎn)品型號(hào)：BC1120-50T/48S

更新時(shí)間：2024-04-24

廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家

訪問(wèn) 量：2161

服務(wù)熱線

010-50973130

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產(chǎn)品分類

PRODUCT CLASSIFICATION

生化檢測(cè)試劑盒-常量法

谷胱甘肽過(guò)氧化物酶4（GPX4）活性檢測(cè) 總谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSH-Px/GPX）活性檢測(cè) α-L-巖藻糖苷酶（AFU）活性檢測(cè) 硫代葡萄糖苷含量檢測(cè) 生物堿含量檢測(cè) 總氧化狀態(tài)（TOS）檢測(cè) α-基丁酸脫氫酶（α－HBDH）活性檢測(cè) 3-磷酸甘油酯酶（GPP）活性檢測(cè) 水溶性物質(zhì)羥自由基清除能力檢測(cè) 植物銨態(tài)氮含量檢測(cè)試劑盒血清（漿）二胺氧化酶（DAO）活性檢測(cè)試劑盒細(xì)胞酸性磷酸酶細(xì)胞堿性磷酸酶果膠系列轉(zhuǎn)氫酶系列光合作用系列維生素系列糖原系列糖異生系列蛋白含量測(cè)定系列其它系列信號(hào)系列土壤系列離子系列 P450系列糖代謝系列蔗糖系列淀粉系列脂肪酸代謝系列蛋白酶系列糖酵解系列三羧酸循環(huán)系列線粒體呼吸鏈系列酯酶系列氨基酸代謝系列氮代謝系列 ATP系列抗逆系列抗氧系列氧化系列維生素C代謝系列谷胱甘肽系列輔酶Ⅱ系列輔酶Ⅰ系列

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產(chǎn)品介紹

NADP-蘋果酸酶（NADP-ME）活性檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書
紫外分光光度法
貨號(hào): BC1120
規(guī)格: 50T/48S
產(chǎn)品組成：使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致，有疑問(wèn)請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

試劑名稱	規(guī)格	保存條件
提取液	液體70 mL×1瓶	2-8℃保存
試劑一	液體40 mL×1瓶	2-8℃保存
試劑二	粉劑×1瓶	2-8℃保存
試劑三	粉劑×2支	2-8℃保存
試劑四	粉劑×2支	-20℃保存

溶液的配制：

試劑二：用時(shí)加入20 mL提取液充分溶解備用；
試劑三：用時(shí)加入用時(shí)每支加1 mL雙蒸水充分溶解備用；
試劑四：用時(shí)每支加500 μL雙蒸水充分溶解備用；
工作液：在15 mL試劑二中加入2 mL試劑三和1 mL試劑四，可以根據(jù)比例現(xiàn)用現(xiàn)配。

產(chǎn)品說(shuō)明：
ME廣泛存在于微生物、培養(yǎng)細(xì)胞、動(dòng)物和植物胞漿中，尤其在植物組織中活性較高。ME催化蘋果酸氧化脫羧的可逆反應(yīng)，產(chǎn)生*酸和CO₂，以及伴隨NAD(P)⁺的還原反應(yīng)，是蘋果酸代謝的關(guān)鍵酶。ME活性與生物合成和抗氧化密切相關(guān)。近年來(lái)植物ME活性測(cè)定較多，已經(jīng)成為抗氧化研究的熱點(diǎn)。根據(jù)輔酶專一性和對(duì)底物特異性的不同，可將ME分為NAD-ME(EC1.1.1.38)和NADP-ME(EC1.1.1.40)。
NADP-ME催化NADP⁺還原成NADPH，在340nm下測(cè)定NADPH增加速率。
注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器和用品：
紫外分光光度計(jì)、低溫離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)節(jié)移液器、1mL石英比色皿、研缽/勻漿器和蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件

注意事項(xiàng)：

若A2-A1大于0.5，需將樣本用提取液稀釋，使A2-A1小于0.5，可提高檢測(cè)靈敏度。
實(shí)驗(yàn)時(shí)，試劑三、試劑四和樣本在冰上放置，以免變性和失活。試劑一37℃或25℃水浴放置。
比色皿中反應(yīng)液的溫度必須保持37℃或25℃，取小燒杯一只裝入一定量的37℃或25℃蒸餾水，將此燒杯放入37℃或25℃水浴鍋中。在反應(yīng)過(guò)程中把比色皿連同反應(yīng)液放在此燒杯中。
最好兩個(gè)人同時(shí)做此實(shí)驗(yàn)，一個(gè)人比色，一個(gè)人計(jì)時(shí)，以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
如果ΔA＜0.01，可將反應(yīng)時(shí)間延長(zhǎng)到5分鐘或10分鐘。

實(shí)驗(yàn)實(shí)例：

取0.1g肝加入1mL提取液進(jìn)行勻漿研磨，取上清，按照測(cè)定步驟操作，測(cè)得計(jì)算ΔA=A2-A1=0.924-0.637=0.287，按樣本質(zhì)量計(jì)算酶活得：

NADP-ME（U/g 質(zhì)量）=4823×ΔA÷W=4823×0.287÷0.1=13842.01 U/g 質(zhì)量。

取0.1g蒜加入1mL提取液進(jìn)行勻漿研磨，取上清，按照測(cè)定步驟操作，測(cè)得計(jì)算ΔA=A2-A1=0.171-0.135=0.036，按樣本質(zhì)量計(jì)算酶活得：

NADP-ME（U/g 質(zhì)量）=4823×ΔA÷W=4823×0.036÷0.1=1736.28 U/g 質(zhì)量。
相關(guān)發(fā)表文獻(xiàn)：
[1] Baohua Zhu,Ruihao Zhang,Nana Lv,et al. The Role of Malic Enzyme on Promoting Total Lipid and Fatty Acid Production in Phaeodactylum tricornutum. Frontier in Immunology. June 2018;(IF4.716)
參考文獻(xiàn)：
[1] Spampinato C P, Colombo S L, Andreo C S. Interaction of analogues of substrate with NADP-malic enzyme from maize leaves[J]. Photosynthesis research, 1994, 39(1): 67-73.
相關(guān)系列產(chǎn)品：
BC0260/BC0265 6-磷酸葡萄糖脫氫酶（G6PDH）活性檢測(cè)試劑盒
BC0400/BC0405 胞漿異檸檬酸脫氫酶（ICDHc）活性檢測(cè)試劑盒
BC2100/BC2105 6-磷酸葡萄糖酸脫氫酶（6PGDH）活性檢測(cè)試劑盒