儲存條件
2-8℃
中文名稱
原果膠含量檢測試劑盒
有效期
6個月
單位
盒
英文名稱
Protopectin Content Assay Kit
檢測方法
可見分光光度法 Spectrophotometer
規格
50T/24S
自備試劑
該試劑盒實驗過程中需自備試劑，詳情見網站說明書

產品型號：BC3680-50T/24S

更新時間：2024-04-15

廠商性質：生產廠家

訪問量：888

服務熱線

010-50973130

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產品分類

PRODUCT CLASSIFICATION

生化檢測試劑盒-常量法

谷胱甘肽過氧化物酶4（GPX4）活性檢測總谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px/GPX）活性檢測 α-L-巖藻糖苷酶（AFU）活性檢測硫代葡萄糖苷含量檢測生物堿含量檢測總氧化狀態（TOS）檢測 α-基丁酸脫氫酶（α－HBDH）活性檢測 3-磷酸甘油酯酶（GPP）活性檢測水溶性物質羥自由基清除能力檢測植物銨態氮含量檢測試劑盒血清（漿）二胺氧化酶（DAO）活性檢測試劑盒細胞酸性磷酸酶細胞堿性磷酸酶果膠系列轉氫酶系列光合作用系列維生素系列糖原系列糖異生系列蛋白含量測定系列其它系列信號系列土壤系列離子系列 P450系列糖代謝系列蔗糖系列淀粉系列脂肪酸代謝系列蛋白酶系列糖酵解系列三羧酸循環系列線粒體呼吸鏈系列酯酶系列氨基酸代謝系列氮代謝系列 ATP系列抗逆系列抗氧系列氧化系列維生素C代謝系列谷胱甘肽系列輔酶Ⅱ系列輔酶Ⅰ系列

產品介紹

原果膠含量檢測試劑盒說明書

可見分光光度法

貨號：BC3680

規格：50T/24S

產品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致，有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。

試劑名稱	規格	保存條件
提取液一	液體100 mL×1瓶（自備）	2-8℃保存
提取液二	液體30 mL×1瓶	2-8℃保存
提取液三	液體50 mL×1瓶	2-8℃保存
試劑一	液體60 mL×1瓶（自備）	2-8℃保存
試劑二	液體3 mL×1瓶	2-8℃保存
試劑三	液體5 mL×1瓶	2-8℃保存
標準品	粉劑×1支	2-8℃保存

溶液的配制：

1、提取液一：80%乙醇，自備。即將80 mL無水乙醇和20 mL蒸餾水混合。

2、試劑一：濃硫酸60 mL，自備。

3、標準品：10 mg半乳糖醛酸，臨用前加入0.943 mL提取液三，配成50 μmol/mL的標準液。

產品說明：

果膠是植物細胞壁主要組成成分之一，分為水溶性果膠和不溶性果膠，不溶性果膠為原果膠。原果膠是不溶于水的物質，但可在酸、堿、鹽等化學試劑及酶的作用下，加水分解轉變成水溶性果膠，在食品、紡織、印染、煙草、冶金等領域具有較廣泛的應用。

原果膠在堿性條件下水解為可溶性果膠，并進一步轉化為半乳糖醛酸，產物在強酸中與咔唑縮合生成紫紅色化合物，在530nm處有特征吸收峰。

注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。

需自備的儀器和用品：

可見分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、1mL玻璃比色皿、可調式移液槍、研缽/勻漿器、丙酮、濃硫酸、無水乙醇和蒸餾水。

操作步驟：

一、樣本處理（可適當調整待測樣本量，具體比例可以參考文獻）

取約0.1g樣本，加入1mL 提取液一，室溫快速勻漿，95℃水浴20min，冷卻至室溫，4000g 25℃離心10min，棄上清。沉淀加入1.5mL 提取液一和丙酮交替各洗2遍（渦旋振蕩2min左右，4000g 25℃離心10min，棄上清即可），沉淀即為粗細胞壁，加入1mL提取液二（去除淀粉）浸泡15小時，4000g 25℃離心10min，棄上清，加入1mL提取液三，充分勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清液待測。

二、測定步驟

1、分光光度計預熱30min以上，調節波長至530nm，蒸餾水調零。

2、將50μmol/mL標準液用提取液三稀釋為0.7、0.6、0.5、0.4、0.2、0.1、0.05、0.025μmol/mL的標準溶液備用。

3、操作表：

試劑名稱	空白管	標準管	對照管	測定管
樣本（μL）	-	-	100	100
標準品（μL）	-	100	-	-
蒸餾水（μL）	100	-	-	-
試劑一（μL）	800	800	800	800
混勻、90℃放置10min，取出后冷卻
試劑二（μL）	-	-	100	-
試劑三（μL）	100	100	-	100
混勻，25℃靜置30min后測定530nm處吸光值，分別記為A空白管、A標準管、A對照管和A測定管。ΔA標準=A標準管-A空白管，ΔA測定=A測定管-A對照管。

三、原果膠含量的計算

1、標準曲線的繪制：

以各個標準溶液的濃度為x軸，其對應的ΔA標準為y軸，繪制標準曲線，得到標準方程y=kx+b，將ΔA測定帶入方程得到x（μmol/mL）。

2、原果膠含量的計算：原果膠含量(μmol/g 質量)=x×V提取液三÷W =x÷W

V提取液三：加入提取液三的體積，1mL；W：樣本質量，g。

注意事項：

1、濃硫酸具有強腐蝕性，操作時需特別注意，90℃加熱取出后冷卻再打開蓋子，以防液體飛濺燒傷。

2、若ΔA超過0.6，可將樣本用提取液三進行適當稀釋再進行測定，并在計算公式中乘以稀釋倍數。

實驗實例：

1. 取0.1g木槿加入1mL 提取液一，室溫快速勻漿，95℃水浴20min，冷卻至室溫，4000g 25℃離心10min，棄上清。沉淀加入1.5mL 提取液一和丙酮交替各洗2遍（渦旋振蕩2min左右，4000g 25℃離心10min，棄上清即可），沉淀即為粗細胞壁，加入1mL提取液二浸泡15小時，4000g 25℃離心10min，棄上清，加入1mL提取液三，充分勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清液之后按照測定步驟操作，測得計算ΔA測定=A測定管-A對照管=0.194-0.044=0.15，依據標準曲線y=0.9322x-0.0232，計算X=0.1858μmol/mL；按樣本質量計算含量得：原果膠含量(μmol/g 質量)= x÷W=1.858 μmol/g 質量。