纖維素酶（CL）活性檢測(cè)試劑盒說明書
微量法
貨號(hào)：BC2545
規(guī)格：100T/48S
產(chǎn)品組成：使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致，有疑問請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

溶液的配制：
標(biāo)準(zhǔn)品：10mg無水*萄糖（干燥失重<0.2%）。臨用前加入1mL蒸餾水溶解，配制成10mg/mL葡萄糖溶液備用，2-8℃保存兩周，或者用飽和苯甲酸溶液溶解，可保存更長(zhǎng)時(shí)間。
產(chǎn)品說明：
CL（EC 3.2.1.4）存在于細(xì)菌、真菌和動(dòng)物體內(nèi)，能夠催化纖維素降解，是一類可廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、食品、棉紡、環(huán)保及可再生資源利用等領(lǐng)域的酶制劑。
采用3,5-二硝基水楊酸法測(cè)定CL催化纖維素降解產(chǎn)生的還原糖的含量。
注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、低溫離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
一、樣本處理（可適當(dāng)調(diào)整待測(cè)樣本量，具體比例可以參考文獻(xiàn)）

1. 細(xì)菌或細(xì)胞：收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照每500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液，超聲冰浴破碎細(xì)菌或細(xì)胞（功率200w，超聲3秒，間隔10秒，重復(fù)30次）；8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。

2. 組織：稱取約0.1g組織加入1mL提取液，冰浴中勻漿。8000g ，4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。

二、測(cè)定步驟
1、分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至540nm，分光光度計(jì)蒸餾水調(diào)零。
2、標(biāo)準(zhǔn)品的準(zhǔn)備：將標(biāo)準(zhǔn)品用蒸餾水稀釋至1、0.8、0.6、0.4、0.2、0.1、0mg/mL。
 

實(shí)驗(yàn)中每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)管需15µL標(biāo)準(zhǔn)溶液。
3、加樣表（在EP管中依次加入下列試劑）： 

相關(guān)發(fā)表文獻(xiàn)：
Guo Q, Du G, Qi H, et al. A nematicidal tannin from Punica granatum L. rind and its physiological effect on pine wood nematode (Bursaphelenchus xylophilus)[J]. Pesticide biochemistry and physiology, 2017, 135: 64-68.
參考文獻(xiàn)：
Faria M L, Kolling D, Camassola M, et al. Comparison of Pennicillium echinulatum and Trichoderma reesei cellulases in relation to their activity against various cellulosic substrates[J]. Biores. Technol, 2008, 99: 1417-1424.
相關(guān)系列產(chǎn)品：
BC0340/BC0345 糖原含量檢測(cè)試劑盒
BC2450/BC2455 植物組織果糖（FT）含量檢測(cè)試劑盒
BC2510/BC2515 海藻糖酶（THL）活性檢測(cè)試劑盒

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